Efeitos da Suplementação com NADH sobre a Ativação Transcricional de REST Mediado Pelas Marcas H3K27me3 e H3K27Ac Sobre a Neuroinflamação Induzida por LPS em Camundongos Senis

O envelhecimento é um processo complexo que altera as funções orgânicas e está associado ao desenvolvimento de doenças degenerativas, comprometendo, em especial, o Sistema Nervoso Central. Estudos mostraram que a expressão reduzida do fator de transcrição Rest em indivíduos idosos está associada à maior incidência de doenças neurodegenerativas. Evidências sugerem que essa repressão transcricional esteja relacionada às modificações nas histonas, que influenciam os processos neuronais envolvidos no envelhecimento cerebral. Além disso, diferentes grupos têm demonstrado que a restauração dos níveis de NADH por meio de sua suplementação pode retardar o desenvolvimento de doenças associadas ao envelhecimento. Desta forma, este estudo objetiva investigar os mecanismos moleculares implicados ao efeito neuroprotetor do NADH utilizando um modelo murino de comprometimento cognitivo induzido por LPS. Para isso serão utilizados camundongos machos e fêmeas com 18 meses de vida que receberão diariamente a suplementação dietética de NADH (300mg/kg) durante 7 dias. Após o término do período de suplementação do NADH por gavagem, o comprometimento cognitivo será induzido pela administração de injeção de lipopolissacarídeo (LPS) (0,25 mg/kg) por 3 dias consecutivos. Após 24 h da última dose, os comportamentos relacionados ao aprendizado, à memória e à atividade geral serão avaliados. Adicionalmente, análises moleculares e bioquímicas serão realizadas para o efeito neuroprotetor do NADH e sua relação com o controle transcricional do gene Rest mediado pelas marcas epigenéticas H3K27me3 e H3K27Ac em camundongos senis.

Investigar os mecanismos moleculares implicados ao efeito neuroprotetor do NAD+ e sua relação com o controle transcricional do gene Rest mediado pelas marcas H3K27me3 e H3k27Ac em camundongos idosos.

Foram utilizados 20 machos e 20 fêmeas. Após suplementação com NAD+ por gavagem durante 5 dias consecutivos, os animais foram submetidos à indução de neuroinflamação por injeção intraperitoneal (i.p.) de LPS na dose de 0,25 mg/kg durante 3 dias consecutivos. Após 24 horas, a atividade geral e a memória foram avaliadas por meio do teste de campo aberto, reconhecimento de objetos e labirinto em y. Em seguida, os animais foram eutanasiados, o hipocampo processado para coloração imuno-histoquímica para Rest e GFAP e imunoprecipitação da cromatina, além de extração de RNA para avaliar a expressão gênica. O plasma também foi coletado para avaliar o perfil de citocinas por citometria de fluxo.